用法完全不同。
「的」通常只能作为构词语素，而「の」是具有重要语法功能的助词之一。
日语中「的」常见有两种读音，分别是音读的「てき」和训读的「まと」，此外还有在「的らか」中读作「あき」，可以作为特例来记。
读作「まと」时，主要用来表示“靶位、目标”，类似“的”在汉语中读dì时的含义。
例如「的外れ」表示“脱靶，没有命中目标”。
在四字熟语「衆矢之的」中，读作「しゅうしのまと」，其中「衆矢」音读，「之」和「的」分别训读为「の」和「まと」。
那什么时候读「てき」呢？
最常见的是，将其当成类似英语的-ic, -ical, -al,-ish, -ive, -ious等后缀来用。
其中有些词在英语中以-tic结尾，类似「てき」-teki，日语借汉字写作「的」，例如：
最终「的」在日语中演变为“表示具有某种性质”的通用后缀，有更多词在英语中可能并非以-tic结尾，翻译到日语中也都带上了「的」，例如：
这些「的」后面不能像汉语那样直接加被修饰成分，而要通过词尾「な」连接。
对于其中很多词，如果将「的」换为「性」，就变成了相应的名词形式。
这种构词直接影响到现代汉语，促生了诸如“客观性”、“计划性”、“建设性”、“实用性”这类词语泛用的现象。
日语中「の」可以作为「之」的训读，但独立使用时一般都直接写成假名形式。
只有在一些固定词语和四字熟语中才会写作「之」，例如前文提到的「衆矢之的」，或者「一技之長」。
但要注意并不是所有熟语中「之」都等于「の」，比如在「一以貫之」、「一言蔽之」中，「之」不作“的”义解，则对应音读「し」。
独立使用时，「の」是日语中最基础最常见的助词之一。
用法非常广泛，整体可分为两大类：
其中第一类用法最易混同于汉语“的”。
将「の」作为连体助词的功能展开，又可分为以下一些情况：
第二类用法相对简单，主要是在从句谓语前作为主语标记。
在这类句式里，汉语“的”通常放在谓语之后，而日语「の」放在谓语之前。
延伸阅读：
有什么方法能够快速分辨出日语自动词他动词？
日语里的"学习"为什么叫"勉强"?
为什么日语中は很多时候读成わ？
日语句子动词后什么时候加ている?
日语中授受动词怎么区别?
日语学久了真的会影响英语发音吗？
日语里「す」su 这个音为什么听着像 si？
